正交试验设计法优选黄芩的提取工艺

正交试验设计法优选黄芩的提取工艺

目的：研究黄芩的提取工艺。方法：采用正交试验设计法，以乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取次数(C)、乙醇用量(D)为四个因素，每个因素设计三个水平进行试验。用HPLC法测定每个试验所得的黄芩苷含量。结果：因素C的影响最大，各因素对黄芩的提取工艺的影响程度依次为 C>B>A>D，即提取次数>提取时间>乙醇浓度>乙醇用量，用A2B1C3D2条件进行提取，所得黄芩苷含量最高。结论：黄芩最佳提取工艺为10倍量的60%乙醇，回流提取3次，每次1 h。

标签： 黄芩；黄芩苷；正交试验设计法；提取工艺

黄芩是唇形科植物Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，其性寒味苦，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效[1]。唐海燕等[2]考察了不同浓度的乙醇对黄芩中黄芩苷的回流提取效果，结果采用50%乙醇时出膏率最高，60%乙醇时黄芩苷得率最高，但对提取时间、提取次数等影响提取效率的因素没有考察。为此，我们采用正交试验设计法，以黄芩苷提取率和流浸膏得率为考察指标，对黄芩的提取工艺做了进一步的研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器

waters 2487紫外检测器；waters 717高效液相色谱仪；waters 600泵；sb 3200超声波清洗器。

1.2 材料

黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号10715-200212）；甲醇（高效液相色谱专用试剂，色谱纯）；磷酸（上海试剂一厂，分析纯）；乙醇（医用）；黄芩药材购自江西汇仁。

2 方法与结果

2.1 样品溶液的制备

根据有关文献资料[3]与预试验，因素-水平安排见表1。取黄芩药材90 g，按表2回流提取浓缩成90 ml，制成流浸膏。

2.2 考察指標的测定

2.2.1黄芩苷的HPLC法测定 流动相：甲醇-水-磷酸（55∶45∶0.2）； 检测波长：280 nm；流速：0.9 ml/min；色谱柱：C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）。

2.2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品8.72 mg，置50 ml容量瓶中，加甲醇超声溶解，冷却后稀释至刻度，摇匀，再精密量取10 ml至25 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1 ml含黄芩苷69.76 μg）。

2.2.1.2 供试品溶液的制备 精密量取试样溶液（即流浸膏）2 ml，置100 ml容量瓶中，加70%甲醇90 ml，超声处理30 min，冷却后加70%甲醇至刻度，摇匀，再精密量取10 ml至25 ml容量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.1.3 样品测定 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定。

2.2.2 流浸膏的测定 根据流浸膏剂每1 ml相当于原有药材1 g，取90 g药材按表2方法提取制成90 ml溶液，精密称量溶液的重量，算出流浸膏得率。

2.2.3结果 以黄芩苷提取率和流浸膏得率为综合评价指标计算，结果见表2、表3。黄芩苷提取率（%）=（提取液中黄芩苷的重量/药材的重量）×100%，流浸膏得率（%）=（流浸膏的重量/药材的重量）×100%，综合评价：y=黄芩苷提取率+流浸膏得率。

2.3 结果分析

根据正交试验方差分析结果和直观分析可见， A2>A1>A3，B1>B2>B3，C3>C2>C1，D2>D1>D3。主次因素依次为：C>B>A>D。 确定最佳试验条件为A2B1C3D2，即黄芩药材加10倍量的60%乙醇，回流提取3次，每次1 h。

3 讨论

从黄芩中提取黄芩苷的工艺研究报道较多，大多以水为溶剂进行煎煮提取，然后通过调酸碱度等操作得到黄芩苷粗品，收率在4%~5%，但该法操作繁琐，生产成本高[4,5]，同时水提取物中杂质成分太多，不利于制剂成型，故本试验选用乙醇作为溶媒，而且其收率较高。

文献报道中一般选用干膏率作为一项确定提取工艺的考核指标，本试验考虑制备干膏需干燥、称重，步骤多、易造成误差，故采用流浸膏得率作为考察指标来进行评价。

[参考文献]

[1]中华人民共和国药典委员会.中国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005.

[2]唐海燕,牛雪平,王文波,等.黄芩中黄芩苷的提取工艺研究[J].内蒙古大学学报(自然科学版),2004, 35(3):355-356.

[3]朱玉,王晓华.正交法优选黄芩的提取工艺[J].安徽医药,2006,10(4):250-251.

[4]郑虎占,黄泽宏,余靖.中药现代研究与应用[M].第4卷.北京:学苑出版社,1998.3943-3977.

[5]翟保同,王莹.黄芩苷提取工艺研究[J].中国医药导报,2007,4(23):91-93.

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