・４６４２・ 中华医院感染学杂志２０１５年第２５卷第２Ｏ期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｏｓ０ｃｏｍｉｏｌ Ｖｏ１．２５ Ｎｏ２０ ２０１５ ．ｄｏｉ：１０．１１８１６／ｃｎ．ｎｉ．２０１５—１４１２１１ 论 著 泌尿生殖道解脲脲支原体与沙眼衣原体感染分析 李彦，肖瑜，刘燕飞，王钰莹，余丽梅 （遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，贵州遵义５６３００３） 摘要：目的探讨泌尿生殖道感染患者中解脲脲支原体（ｕｕ）和沙眼衣原体（ｃｔ）的感染情况，为临床早期诊断及 应用实时荧光定量ＰＣＲ（ＦＱ－ＰＣＲ）技术，对２００４年１月一２０１３年１２月门诊皮肤性病 时治疗提供依据。方法科就诊的２ ６２５例不同年龄段的疑似感染患者进行Ｕｕ及Ｃｔ核酸检测与分析。结果 ２ ６２５例患者标本中病原 体检测阳性１ １３８例，阳性率为４３．３５ ，其中，检测Ｕｕ阳性８１５例阳性率３１．０５％、Ｃｔ阳性２２６例阳性率 ８．６１％、Ｕｕ＋Ｃｔ阳性９７例阳性率３．７０％；女性患者送检标本中ｕｕ检测阳性率为４４．１４ ，明显高于男性患者的 ２８．０２ ；而女性患者Ｃｔ阳性率４．８６ 低于男性患者的９．４８ ，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；２１～３０岁和 ３１￣４０岁年龄患者分别占４２．９３ 和３９．９２％，其次为４１￣５０岁者，≥６０岁患者仅占０．５０％，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．Ｏ１）；２Ｏ０４—２０１３年ｕｕ检测阳性率呈波浪式上升趋势，而ｃｔ、ｕｕ＋Ｃｔ检测阳性率在２００４—２０１１年的波 浪式上升后，近两年呈明显下降趋势，差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论本地区在泌尿系统感染的疑似患者 中，主要以Ｕｕ、Ｃｔ的单独感染为主，以Ｕｕ感染占多数，主要集中在青壮年人群中，且这两种病原体感染近十年来 有上升的迹象，因此对疑似病例应用实时荧光ＰＣＲ快速诊断具有重要的临床指导意义。 关键词：荧光定量聚合酶链反应；沙眼衣原体；解脲脲支原体 中圈分类号：Ｒ３７５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００５—４５２９（２０１５）２Ｏ一４６４２—０３ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｕｒｏｇｅｎｉｔａｌ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ ａｎｄ Ｃｈｌａｍ ｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ ＬＩ Ｙａｎ，ＸＩＡＯ Ｙｕ，Ｌｉｕ Ｙａｎ—ｆｅｉ，Ｗａｎｇ Ｙｕ—ｙｉｎｇ，ＹＵ Ｌｉ—ｍｅｉ （Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｚｕｎｙｉ Ｍｅｄｃｉａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｕｎｙｉ，Ｇｕｉｚｈｏｕ ５６３００３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ（Ｕｕ）ａｎｄ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａ－ ｔｉｓ（Ｃｔ）ｃａｕｓｉｎｇ ｕｒｅｔｈｒｉｔｉｓ ｓｏ ａｓ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｅａｒｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｔｏｔａｌｌｙ ２６２５ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｃａｓｅｓ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ｊａｎ．２００４ ｔｏ Ｄｅｃ．２０１３ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ＰＣＲ（ＦＱ＿ＰＣＲ）． ＲＥＳＵＬＴＳ Ｉｎ ２６２５ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ，１１３８ ｐｒｏｖｅｄ ｔｏ ｂｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｎ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｔｅｓｔｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ４３．３５ ．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍ，８１５ ｗｅｒｅ Ｕｕ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ３１．０５ ａｎｄ ２２６ ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ Ｃｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ８．１６ ．Ｔｏｔａｌｌｙ ９７ ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｏｖｅｄ ｔｏ ｂｅ ｂｏｔｈ Ｕｕ ａｎｄ Ｃｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ３．７０ ．Ｔｈｅ ｉｎ— ｆｅｅｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ｕｕ ｉｎ ｆｅｍａｌｅｓ（４４．１４ ）ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｍａｌｅｓ（２８．０２ ）（Ｐ＜Ｏ．０１）；ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ ｉｎｆｅｅ— ｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ｃｔ ｉｎ ｆｅｍａｌｅｓ（４．８６ ）ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｍａｌｅｓ（９．４８ ）．Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜ ０．０１）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ４２．９３ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ２１ ａｎｄ ３０ ａｎｄ ３９．９２ ｗｅｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ３１ ａｎｄ ４０．Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｖｅｒ ６０ ｏｎｌｙ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ０．５０ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｕｕ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｓｈｏｗｅｄ ａ ｗａｖｅ—ｌｉｋｅ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｒｅｎｄ ｆｒｏｍ ２００４ ｔｏ ２０１３，ｗｈｉｌｅ Ｃｔ ｏｒ Ｕｕ＋Ｃｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆｒｏｍ ２００４ ｔｏ ２０１３ ａｎｄ ｓｈｏｗｅｄ ａｎ ｏｂｖｉｏｕｓ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｒｅｎｄ ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ２ ｙｅａｒｓ．Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）． ＣｏＮＣＬＵＳ１０Ｎ Ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ｕｒｅｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｍａｉｎｌｙ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｕｕ ｏｒ Ｃｔ ａｎｄ Ｕｕ ｗａｓ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｐａｔｈｏ— ｇｅｎ．Ｙｏｕｎｇ ａｄｕｌｔｓ ａｒｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅｓｅ ｔｗｏ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｐａｔｈｏ— ｇｅｎｓ ｓｈｏｗｅｄ ａｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｒｅｎｄ；ｈｅｎｃｅ ＦＱ－ＰＣＲ ｉｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｇｕｉｄｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｃａｓｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＰＣＲ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ￣Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ；Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ 收稿日期：２０１５—０６—１５；修回日期：２０１５—０８—１１ 基金项目：贵州省细胞工程中心建设和贵州省资金临床应用专项基金资助项目［黔省专合字（２０１２）１０７］ 通信作者：余丽梅，Ｅ—ｍａｉｌ：１９６７３６７８４４＠ｑｑ．ｃｏｍ 中华医院感染学杂志２０１５年第２５卷第２Ｏ期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｏｓｏｅｏｍｉｏｌ Ｖｏ１．２５ Ｎｏ．２０ ２０１５ 解脲脲支原体（Ｕｕ）和沙眼衣原体（ｃｔ）是泌尿 生殖道感染的常见致病微生物，也是目前性传播疾 表１ ２ ６２５例患者标本中病原体检测阳性率（ ） Ｔａｂｌｅ １ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｏｆ Ｕｕ ａｎｄ Ｃｔ ｉｎ ２ ６２５ ｓａｍｐｌｅｓ（ ） 病的主要病原体之一，可引起前列腺炎、附睾炎、宫 颈炎、尿道炎、盆腔炎等口］，与异位妊娠、不孕症、早 产，乃至宫颈癌发生等有关，可通过母婴垂直传播引 起新生儿感染和黄疸等，不仅危害个人健康，殃及家 庭、遗害后代、还危害社会。培养法、涂片法、免疫法 等传统病原体检测方法存在检出率低、周期长、特异 者的２８．Ｏ２ ；而女性患者Ｃｔ阳性率４．８６％低于男 性差等缺点，给临床诊断带来困难。荧光定量聚合 性患者的９．４８ ９／５，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）， 酶链反应（ＦＱ＿ＰＣＲ）检测技术是目前最为常用的一 项快速检测技术，具有简便、特异和高灵敏度的特 点，其应用显著缩短了明确诊断的检测时间和准确 性，也有利于了解Ｕｕ、Ｃｔ感染的性病发生与分布， 并为其预防控制方案的确定奠定基础。 １材料与方法 １．１ 标本来源 收集２００４年１月一２０１３年１２月 医院门诊皮肤性病科就诊的２ ６２５例患者送检样 本，其中男２ １３１例、女性４９４例，年龄１８～７８岁。 男性尿道分泌物和女性阴道、宫颈分泌物，均按标本 采集规范，采用棉拭子采集，并将棉拭子置入无菌样 品收集管中，密闭送检。 １．２仪器与试剂ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅ实时荧光定量ＰＣＲ 仪，Ｕｕ、Ｃｔ检测试剂盒由中山大学达安基因股份有 限公司生产。样本制备严格按照厂家试剂说明书， 向样品收集管中加入１ ｍｌ灭菌生理盐水，经离心、 去上清，和提取沉淀中ＤＮＡ等步骤制备待检样本， 设置一同处理的阴性、阳性质控品。 １．３ ＦＱ－ＰＣＲ将处理好的样品、阴性和阳性质控 品上清液２ ｌ加入专用毛细管中，离心后，插入 ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ实时荧光定量ＰＣＲ仪卡盘，进行 ＦＱ－ＰＣＲ，扩增条件：９３℃，２ ｍｉｎ，９３℃，５ Ｓ，５７℃， ４５ Ｓ，４０个循环。使用ＬｉｇｈｔＣｙｅｌｅｒ３ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ 软件的分析功能，计算所测样本所含Ｕｕ、Ｃｔ的拷贝 数，≥１×１０。ｃｏｐｉｅｓ，判断为阳性。 １．４ 统计分析 数据采用ＳＰＳＳ１７．０软件进行统 计分析，行 检验，Ｐ％０．０５为差异有统计学意义。 ２ 结 果 ２．１ Ｕｕ、Ｃｔ检测阳性率 ２ ６２５例患者标本中病 原体检测阳性１ １３８例，阳性率为４３．３５％，Ｕｕ与 Ｃｔ、Ｕｕ＋Ｃｔ阳性率比较，差异有统计学意义 （Ｐ＜Ｏ．０１），见表１。 ２．２ 不同性别Ｕｕ、Ｃｔ检测阳性率 女性患者送检 标本中Ｕｕ检测阳性率为４４．１４ ，明显高于男性患 Ｕｕ＋Ｃｔ阳性率男性与女性之间比较，差异无统计 学意义，见表２。 表２ ２ １３１例男性与４９４例女性送检样本中 Ｕｕ、Ｃｔ的阳性率（ ） Ｔａｂｌｅ ２ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｏｆ Ｕｕ ａｎｄ Ｃｔ ｉｎ ２ １３１ ｍａｌｅ ｓｄｍｐｌｅｓ ａｎｄ ４９４ ｆｅｍａｌｅ ｓａｍｐｌｅｓ（ ） ２．３ 不同年龄患者分布 ２１～３Ｏ和３１～４Ｏ岁年 龄患者分别占４２．９３ 和３９．９２ ，其次为４１～５Ｏ 岁者，≥６０岁患者仅占０．５０ ，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０１），见表３。 表３ 不同年龄患者的分布及构成比（ ） Ｔａｂｌｅ ３ Ａｇｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ ｒａｔｉｏ ｉｎ ２６２５ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｓａｍｐｌｅｓ（％） ２．４病原体检测阳性率的变化趋势 ２００４—２０１３ 年Ｕｕ检测阳性率呈波浪式上升趋势，而Ｃｔ、Ｕｕ＋ ｃｔ检测阳性率在２００４—２０１１年的波浪式上升后， 近２年呈明显下降趋势，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５），见表４。 ３讨 论 Ｕｕ和Ｃｔ侵入泌尿生殖道早期多呈现隐匿感 染，临床表现多无特异性，容易误诊或漏诊，目前临 床诊断主要依靠ＦＱ－ＰＣＲ获得的实验室检查结果， 中华医院感染学杂志２０１５年第２５卷第２Ｏ期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｏｓｏｃｏｍｉｏｌ Ｖｏ１．２５ Ｎｏ．２０ ２０１５ 表４ ２００４—２０１３年Ｕｕ、Ｃｔ和Ｕｕ＋Ｃｔ 检测阳性率（％）变化 Ｔａｂｌｅ ４ Ｔｈｅ ｒａｔｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ Ｕｕ，Ｃｔ ａｎｄ ｄｏｕｂｌｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ＺｕｎＹｉ ａｒｅａ ｂｅｔｗｅｅｎ ２００４—２０１３（ ） 本组资料送检样本和检出ｕｕ、Ｃｔ感染阳性的 患者中，均以２１～４Ｏ岁患者比例最高，其次为４１～ ５Ｏ岁者，≥６０岁者最少，说明本地区Ｕｕ、Ｃｔ的感染 同国内其他地区发病年龄具有一定的相似性 ，但 ＞６Ｏ岁的患者却仅有极低的Ｕｕ感染。青壮年人 群处于性行为活跃期，加之自我保护意识不强及性 年份 蠢 ｇ ｕ 函 Ｃｔ Ｕｕ ＋ Ｃｔ 行为较乱等原因，是导致泌尿生殖道性传播疾病高 发的主要原因。随着年龄的增加，性行为的减少及 生活方式和行为的改变，Ｕｕ、Ｃｔ阳性率也随之下 降。此外，１６～２０岁人群中Ｕｕ、Ｃｔ的一定数量感 染，也提醒我们要注意性传播性疾病感染的低龄化， 若不能及时、准确、有效的诊治，可能导致疾病的传 播，也可能导致引发不孕不育 ］。尤其在本地区 合计 Ｕｕ阳性率一直呈上升趋势的情况下，低龄者也随 之增多的现实不容忽视；在贵州省开展临床基因扩 从而使Ｕｕ、Ｃｔ感染的性传播疾病得到及时确诊和 及早治疗，有利于有效控制病原体传播和预防并发 症。 增技术机构有限的情况下，及时通过ＦＱ—ＰＣＲ技术 早期诊断、及时治疗，对于有效控制Ｕｕ、Ｃｔ感染及 传播也十分重要。 参考文献 Ａｂｕｓａｒａｈ ＥＡ，Ａｗｗａｄ ＺＭ，Ｃｈａｒｖａｌｏｓ Ｅ。ｅｔ ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｅ— ｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｓｅｘｕａｌｌｙ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｉｎ ｓｅｍｅｎ 本调查结果显示，泌尿生殖道感染患者中，Ｕｕ 与Ｃｔ阳性率之和达到９１．４８ ９／６，明显高于Ｕｕ＋Ｃｔ 阳性率８．５２ ９／６，说明本地区主要以Ｕｕ、Ｃｔ的单独感 染为主；而在单独感染中，Ｕｕ感染者占７１．６２ ，说 明本地区主要以支原体属感染为主，与文献报道的 支原体感染占性传播疾病首位一致＿２］。本研究中 Ｃｔ阳性率与陆泉等＿３ 报道的７．３９ 相近，但与谭琳 ａｎｄ ｕｒｉｎｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｏｆ ｉｎｆｅｒｔｉｌｅ ａｎｄ ｆｅｒｔｉｌｅ ｍａｌｅｓ［Ｊ］．Ｄｉａｇｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，２０１３，７７（４）：２８３—２８６． 黄莲芬．实时荧光定量ＰＣＲ在生殖泌尿道疾病诊断中的应用 ［Ｊ］．吉林医学，２０１１，３２（３）：４４０—４４１． 陆泉，袁彩云，谢春英，等．１１２５４例生殖道沙眼衣原体感染荧 光ＰＣＲ检测结果分析口］．中国艾滋病性病，２０１３，Ｉ９（１０）： ７６０—７６２． 琳等嘲报道的２Ｏ．４１ ９／６不同，说明可能Ｃｔ感染存在 地区差异，也可能与各研究中所用检测试剂盒及其 最低检测限差异有关。 送检标本中Ｕｕ阳性率女性高于男性，而Ｃｔ阳 性率女性却低于男性，与毛源等［５］ 报道江苏地区等 Ｕｕ、Ｃｔ感染情况相似；阳性检出病例中，Ｕｕ、Ｃｔ、Ｕｕ ＋Ｃｔ混合感染的感染占比均为男性高于女性，提 示，可能因女性患者感染Ｕｕ、Ｃｔ后，常无自觉症状 谭琳琳，任君，姜珂，等．２２００例生殖道沙眼衣原体核酸扩增 检测结果分析［Ｊ］．重庆医学，２０１３，４２（３５）：４３３３—４３３５． 毛源，王晶．江苏地区男性与女性ＮＧ、ＣＴ及ｕｕ感染情况比 较［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１２，３３（１９）：２３５０—２３５１． 余雪姣，李红胜，陈松劲，等．应用实时荧光ＰＣＲ检测男性尿 道炎病原体的结果与分析［Ｊ］．中华医院感染学杂志，２０１２，２２ （２０）：４６７１－４６７２． Ｚｈｏｕ Ｙ。Ｘｕ ＸＬ，Ｗａｎｇ ＣＰ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ａｎｄ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｉｎ ｕｒｏ— ｇｅｎｉｔａｌ ｔｒａｃｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ３２７ ｃａｓｅｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｔｕｂａｌ ｉｎｆｅｒ 或症状较轻微，易被忽视，未能及时就诊，男性感染 患者就诊人数高于女性，导致阳性率与感染占比性 别差异的不一致。因此，对于男性感染患者，应建议 其女性伴侣也进行检测，这可能有助于及时有效地 切断性病的传播。 ｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ Ｓｈｉ Ｙａｎ Ｈｅ Ｌｉｎ Ｃｈｕａｎｇ Ｂｉｎｇ Ｄｕ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ，２０１１，２５（３）：２Ｏ１－２０４．
